Amidas (AMD)
Enzymer:Är makromolekylära biologiska katalysatorer, de flesta enzymer är proteiner
Amidas:Katalysera hydrolysen av olika endogena och främmande alifatiska och aromatiska amider genom att överföra en acylgrupp till vatten med produktion av fria syror och ammoniak. Hydroxamsyror och andra organiska syror används ofta som läkemedel eftersom de är beståndsdelar i tillväxtfaktorer, antibiotika och tumörhämmare. Amidaser kan delas in i R-typ och S-typ acylaser enligt katalysatorns stereoselektivitet.
Förutom att katalysera hydrolysen av amider kan amidas också katalysera acylöverföringsreaktioner i närvaro av samsubstrat såsom hydroxylamin.
Amidaser med olika källor har olika substratspecificitet, vissa av dem kan bara hydrolysera aromatiska amider, vissa av dem kan bara hydrolysera alifatiska amider, och vissa hydrolyserar α- eller ω-aminoamider. De flesta aminerna har god katalytisk aktivitet endast för acykliska eller enkla aromatiska amider, men för komplexa aromater har heterocykliska amider, särskilt amider med ortosubstituenter, generellt låg aktivitet (endast ett fåtal enzymer uppvisar bättre katalytiska effekter).
Katalytisk mekanism:
| Enzymer | Produktkod | Produktkod |
| Enzympulver | ES-AMD-101~ ES-AMD-119 | en uppsättning av 19 amidaser, 50 mg vardera 19 artiklar * 50 mg / artikel, eller annan mängd |
| Screeningkit (SynKit) | ES-AMD-1900 | en uppsättning av 19 amidaser, 1 mg vardera 19 artiklar * 1 mg / artikel |
★ Hög substratspecificitet.
★ Stark kiral selektivitet.
★ Hög konverteringseffektivitet.
★ Färre biprodukter.
★ Milda reaktionsförhållanden.
★ Miljövänlig.
➢ Enzymscreening bör utföras för specifika substrat på grund av substratspecificiteten, och man bör hitta ett enzym som katalyserar målsubstratet med bästa katalytiska effekt.
➢ Kontakta aldrig med extrema förhållanden såsom: hög temperatur, högt/lågt pH och organiska lösningsmedel med hög koncentration.
➢ Normalt bör reaktionssystemet innefatta substrat, buffertlösning (enzymets optimala reaktions-pH). Kosubstrat såsom hydroxylamin bör finnas i acylöverföringsreaktionssystemet.
➢ AMD bör tillsättas sist i reaktionssystemet med optimalt reaktions-pH och temperatur.
➢ Alla typer av AMD har olika optimala reaktionsförhållanden, så var och en av dem bör studeras vidare individuellt.
Exempel 1(1):
Hydrolysaktivitet till olika amidsubstrat
| Substrat | Specifik aktivitet μmol min-1mg-1 | Substrat | Specifik aktivitet μmol min-1mg-1 |
| Acetamid | 3,8 | ο-OH bensamid | 1.4 |
| Propionamid | 3,9 | p-OH bensamid | 1.2 |
| Laktamid | 12,8 | ο-NH2bensamid | 1.0 |
| Butyramid | 11.9 | p-NH2bensamid | 0,8 |
| Isobutyramid | 26.2 | ο-Toluamid | 0,3 |
| Pentanamid | 22,0 | p-Toluamid | 8.1 |
| Hexanamid | 6.4 | Nikotinamid | 1.7 |
| Cyklohexanamid | 19,5 | Isonikotinamid | 1.8 |
| Akrylamid | 10.2 | Pikolinamid | 2.1 |
| Metakrylamid | 3,5 | 3-fenylpropionamid | 7.6 |
| Prolinamid | 3.4 | Indol-3-acetamid | 1.9 |
| Bensamid | 6,8 |
Reaktionen utfördes i 50 mM natriumfosfatbuffertlösning, pH 7,5, vid 70 ℃.
| Amider | Hydroxylamin | Hydrazin |
| Acetamid | 8.4 | 1.4 |
| Propionamid | 18.4 | 3.0 |
| Isobutyramid | 25,0 | 22,7 |
| Bensamid | 9.2 | 6.1 |
Reaktionen utfördes i 50 mM natriumfosfatbuffertlösning, pH 7,5, vid 70 ℃.
Relaterad reagenskoncentration: amider, 100 mM (bensamid, 10 mM); hydroxylamin och hydrazin, 400 mM; enzym 0,9 μM.
Exempel 2(2):
Exempel 3(3):
1. D'Abusco AS, Ammendola S., et al. Extremophiles, 2001, 5:183-192.
2. Guo FM, Wu JP, Yang LR, et al. Processbiokemi, 2015, 50(8): 1400-1404.
3. Zheng RC, Jin JQ, Wu ZM, et al. Bioorganisk kemi, 2017, Tillgänglig online 7.
