Amidas (AMD)
Enzymer:Är makromolekylära biologiska katalysatorer, de flesta enzymer är proteiner
Amidas:Katalysera hydrolysen av olika endogena och främmande alifatiska och aromatiska amider genom att överföra en acylgrupp till vatten med produktion av fria syror och ammoniak.Hydroxamsyror och andra organiska syror används i stor utsträckning som läkemedel eftersom de är beståndsdelar av tillväxtfaktorer, antibiotika och tumörhämmare.Amidaserna kan delas in i acylaser av R-typ och S-typ enligt katalysatorns stereoselektivitet.
Förutom att katalysera hydrolysen av amider kan amidas även katalysera acylöverföringsreaktioner i närvaro av samsubstrat såsom hydroxylamin.
Amidas med olika källor har olika substratspecificitet, vissa av dem kan endast hydrolysera aromatiska amider, vissa av dem kan bara hydrolysera alifatiska amider och vissa hydrolysera a- eller ω-aminoamider.De flesta av aminerna har god katalytisk aktivitet endast för acykliska eller enkla aromatiska amider, men för komplexa aromater har heterocykliska amider, speciellt amider med ortosubstituenter, i allmänhet låg aktivitet (endast ett fåtal enzymer uppvisar bättre katalytiska effekter).
Katalytisk mekanism:
Enzymer | Produktkod | Produktkod |
Enzympulver | ES-AMD-101~ ES-AMD-119 | en uppsättning av 19 amidaser, 50 mg vardera 19 artiklar * 50 mg / objekt, eller annan kvantitet |
Screening Kit (SynKit) | ES-AMD-1900 | en uppsättning av 19 amidaser, 1 mg vardera 19 artiklar * 1 mg / st |
★ Hög substratspecificitet.
★ Stark kiral selektivitet.
★ Hög konverteringseffektivitet.
★ Mindre biprodukter.
★ Milda reaktionsförhållanden.
★ Miljövänlig.
➢ Enzymscreening bör utföras för specifika substrat på grund av substratspecificiteten, och få ett enzym som katalyserar målsubstratet med bästa katalytiska effekt.
➢ Ta aldrig kontakt med extrema förhållanden som: hög temperatur, högt/lågt pH och organiskt lösningsmedel med hög koncentration.
➢ Normalt bör reaktionssystemet inkludera substrat, buffertlösning (enzymets optimala reaktions-pH).Samsubstrat såsom hydroxylamin bör finnas i acylöverföringsreaktionssystem.
➢ AMD bör tillsättas sist i reaktionssystemet med optimalt reaktions-pH och temperatur.
➢ Alla typer av AMD har olika optimala reaktionsförhållanden, så var och en av dem bör studeras ytterligare individuellt.
Exempel 1(1):
Hydrolysaktivitet till olika amidsubstrat
Substrat | Specifik aktivitet μmol min-1mg-1 | Substrat | Specifik aktivitet μmol min-1mg-1 |
Acetamid | 3.8 | ο-OH-bensamid | 1.4 |
Propionamid | 3.9 | p-OH-bensamid | 1.2 |
Laktamid | 12.8 | ο-NH2bensamid | 1.0 |
Butyramid | 11.9 | p-NH2bensamid | 0,8 |
Isobutyramid | 26.2 | ο-Toluamid | 0,3 |
Pentanamid | 22,0 | p-Toluamid | 8.1 |
Hexanamid | 6.4 | Nikotinamid | 1.7 |
Cyklohexanamid | 19.5 | Isonikotinamid | 1.8 |
Akrylamid | 10.2 | Picolinamid | 2.1 |
Metakrylamid | 3.5 | 3-Fenylpropionamid | 7.6 |
Prolinamid | 3.4 | Indol-3-acetamid | 1.9 |
Bensamid | 6.8 |
Reaktionen utfördes i 50 mM natriumfosfatbuffertlösning, pH 7,5, vid 70°C.
Amider | Hydroxylamin | Hydrazin |
Acetamid | 8.4 | 1.4 |
Propionamid | 18.4 | 3.0 |
Isobutyramid | 25,0 | 22.7 |
Bensamid | 9.2 | 6.1 |
Reaktionen utfördes i 50 mM natriumfosfatbuffertlösning, pH 7,5, vid 70°C.
Relaterad reagenskoncentration: amider, 100 mM (bensamid, 10 mM);hydroxylamin och hydrazin, 400 mM;enzym 0,9 μM.
Exempel 2(2):
Exempel 3(3):
1. D'Abusco AS, Ammendola S., et al.Extremophiles, 2001, 5:183-192.
2. Guo FM, Wu JP, Yang LR, et al.Process Biochemistry, 2015, 50(8): 1400-1404.
3. Zheng RC, Jin JQ, Wu ZM, et al.Bioorganisk kemi, 2017, tillgänglig online 7.